Criando uma série de diluição química

Em química, uma diluição é o processo de reduzir a concentração de uma substância em uma solução. Uma diluição em série ou série de diluição é a diluição repetida de uma solução para amplificar rapidamente o fator de diluição. Isso geralmente é realizado durante experimentos que exigem soluções muito diluídas com grande precisão, como aquelas com curvas de concentração em escala logarítmica ou aqueles experimentos para determinar a densidade de contagem bacteriana. Diluições seriadas são amplamente utilizadas em ciências experimentais, como bioquímica, microbiologia, farmacologia e física.

Degraus

Método 1 de 2: Realize uma diluição padrão

Imagem intitulada Do Serial Dilutions Step 1
1. Determine qual é o diluente certo. O líquido que você usará para diluir uma substância é muito importante. Muitas soluções são diluídas em água destilada, mas nem sempre é assim. Se você vai diluir bactérias ou outras células, provavelmente vai diluir em meio de cultura. O líquido que você escolher será usado para cada diluição em série.
  • Se você não tiver certeza de qual diluente usar, peça ajuda ou procure on-line para ver se outras pessoas fizeram uma diluição semelhante.
Imagem intitulada Do Serial Dilutions Step 2
2. Prepare vários tubos de ensaio com 9 ml de diluente. Esses tubos servem como os valores iniciais de sua diluição. Você vai adicionar a amostra não diluída ao primeiro tubo e depois diluir em série nos seguintes tubos.
  • É útil rotular todos os tubos antes de começar, para não ficar confuso quando começar a trabalhar com as diluições.
  • Cada tubo de ensaio contém uma diluição de 10 vezes em comparação com o líquido não diluído. O primeiro tubo de ensaio torna-se uma diluição de 1:10, o segundo de 1:100, o terceiro de 1:1000, etc. Predeterminar o número de diluições que você precisa para não desperdiçar tubos de ensaio ou diluente.
  • Imagem intitulada Do Serial Dilutions Step 3
    3. Prepare um tubo de ensaio com pelo menos 2 ml da solução não diluída. A quantidade mínima necessária para esta diluição em série é de 1 ml da solução não diluída. Se você tiver apenas 1 ml, não receberá nenhuma solução não diluída restante. Rotule este tubo como OO para solução pura.
  • Misture bem a solução antes de diluir.
  • Imagem intitulada Do Serial Dilutions Step 4
    4. Faça a primeira diluição. Pegue 1 ml da solução não diluída no tubo de ensaio OO com uma pipeta e transfira para o tubo de ensaio rotulado 1:10 com 9 ml do diluente e misture. Há agora 1 ml da solução não diluída em 9 ml do diluente. Assim, a solução é diluída por um fator de 10.
    Imagem intitulada Do Serial Dilutions Step 5
    5. Faça a segunda diluição. Para a segunda diluição em série, retire 1 ml da solução do tubo de ensaio 1:10 e faça isso com a diluição de 9 ml no tubo de ensaio 1:100. Misture o tubo de ensaio 1:10 completamente antes de adicionar ao próximo tubo de ensaio. Mais uma vez o tubo de ensaio 1:100 após diluição. A solução do tubo de ensaio 1:10 agora é diluído 10 vezes no tubo de ensaio 1:100.
    Imagem intitulada Do Serial Dilutions Step 6
    6. Estenda este procedimento para diluições em série com mais séries. Este processo pode ser repetido quantas vezes forem necessárias para obter a solução desejada. Em um experimento com curvas de concentração, você pode fazer uma diluição em série de uma série de soluções com diluições de 1, 1:10, 1:100, 1:1000.

    Método 2 de 2: Calcule o fator de diluição final e a concentração

    Imagem intitulada Do Serial Dilutions Step 7
    1. Calcular a razão da diluição final em uma diluição em série. A razão de diluição total pode ser determinada multiplicando o fator de diluição de cada etapa que leva até a última etapa. Isso pode ser matematicamente ilustrado com a equação dt=D1 xD2 xD3 x ... x Dn através do qual dt o fator de diluição total é e dn a razão de diluição.
    • Por exemplo, digamos que você aplicou uma diluição de 1:10 a um líquido 4x. Aplique seu fator de diluição à equação: Dt=10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
    • O fator de diluição final no quarto tubo de ensaio de sua diluição em série é 1:10.000. A concentração da substância é agora 10.000 vezes menos do que a solução original não diluída.
    Imagem intitulada Do Serial Dilutions Step 8
    2. Determine a concentração da solução após a diluição. Para determinar a concentração final da solução após a diluição em série, você precisa conhecer a concentração inicial. A equação é Cvalor terminal=Cvalor inicial/D através do qual Cvalor terminal é a concentração final da solução diluída, Cvalor inicial a concentração inicial da solução original e d a razão de diluição conforme determinado anteriormente.
  • Por exemplo: Se você começou com uma solução de células com concentração de 1.000.000 células por ml e uma razão de diluição de 1.000, então qual é a concentração final da amostra diluída?
  • Usando a equação:
  • Cvalor terminal=Cvalor inicial/D
  • Cvalor terminal=1.000.000/1.000
  • Cvalor terminal=1.000 células por ml.
  • Imagem intitulada Do Serial Dilutions Step 9
    3. Verifique se todas as unidades correspondem. Ao realizar um cálculo, você deve garantir que as unidades do resultado final estejam sempre corretas. Se você começou com `células por ml`, certifique-se de terminar também com `células por ml`. Se sua concentração inicial estiver em "partes por milhão (ppm)", sua concentração final também deve ser "ppm".

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